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凯氏定氮法的优缺点及注意事项

文化常识 2023-08-16 19:52:01
生活中很多小伙伴不了解凯氏定氮法的优缺点及注意事项这件事,今天小编针对这个问题做了这篇文章,详细内容我们来看一下。

凯氏定氮法的优缺点及注意事项

优点:可用于所有食物的蛋白质分析;操作相对简单;实验成本低;结果准确,是测定蛋白质的经典方法。改进后的方法可用于样品中微量蛋白质的测定。缺点:最终测定的是总有机氮,而不仅仅是蛋白氮;实验时间太长;准确度差,低于双缩脲法;使用的试剂具有腐蚀性。

需要注意的事项

1、样品要均匀,所以固体样品要事先磨细,液体样品要混合均匀。

2.在蒸馏过程中,产生的蒸汽应充足且均匀。加样后要用少量蒸馏水冲洗,以免影响偏低的结果。氧化镁应迅速加入,以防止氨损失。冷凝器的管口应穿入吸收液中,以防止氨的损失。

3.蒸馏后,让接收瓶的液面离开冷凝管的下端,并将其置于冷凝管下方。用冷凝液冲洗喷嘴内壁,蒸1min后关闭热源,否则会造成吸收液反吸。

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮含量的方法。即在催化剂的存在下,样品用浓硫酸消化,将有机氮全部转化为无机铵盐,然后铵盐在碱性条件下转化为氨,用水蒸气蒸馏,用过量的硼酸溶液吸收,再用标准盐酸滴定,计算出样品中的氮含量。

由于蛋白质中的氮含量相对恒定,可以由氮含量计算出蛋白质含量,因此该方法是一种经典的蛋白质定量方法。


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