生活中，有很多朋友觉得核酸初筛阳性是什么意思,艾滋病检测时不需要出示证件一旦这个问题很难，那么我们到底要如何解决这个问题呢，今天小编就带来大家看看，希望可以帮助各位朋友。
1、艾滋病检测时不需要出示证件一旦关键词:艾滋病检测】HIV实验室技术与方法艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的免疫缺陷性疾病[1]。HIV感染的诊断是艾滋病预防和控制的重要组成部分，建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查至关重要。控制艾滋病的流行尤为重要。本文综述了HIV检测技术的现状和进展。1.HIV侵入人体后，其表面糖蛋白gp120以高亲和力与细胞表面受体蛋白CD4结合，吸附在宿主细胞上；然后Gp120与宿主细胞表面的辅助受体相互作用，使病毒更接近宿主细胞膜；Gp41产生一系列构象变化，其N端融合肽片段插入宿主细胞膜，导致病毒包膜与细胞膜最终融合，病毒RNA进入细胞。HIV感染后，首先可以检测到病毒RNA，然后是p24抗原，最后是抗体[2]。在感染后的10 ~ 14天内，病毒RNA水平呈指数上升，然后下降并保持在一个持续稳定的水平。进入艾滋病毒的无症状期[3]。P24抗原水平随着病毒RNA水平的发展而发展，可在急性感染期出现，被认为是病毒复制的间接标志，但由于检测方法缺乏敏感性，检测时间晚于RNA。从感染艾滋病病毒到检测出艾滋病病毒抗体的这段时间称为“窗口期”。在窗口期，可以通过病毒RNA、P24抗原和CD4淋巴细胞水平来判断HIV感染。CD4淋巴细胞水平随着感染的发展而逐渐降低。当血液中的细胞数量下降到200个/mL时，就会出现严重的免疫缺陷，患者就会被诊断为艾滋病。病毒RNA、p24抗原、HIV抗体和CD4淋巴细胞的水平可用于确定HIV感染。检测疾病的发展[4]。HIV属于逆转录病毒家族慢病毒属中的人类免疫缺陷病毒组。迄今为止，根据血清学反应和病毒核酸序列测定，全球流行的HIV可分为两种类型:HIV 1型和HIV 2型[5]。在HIV型内部，根据编码包膜蛋白的env基因和编码衣壳蛋白的gag基因的同源性，进一步分为M群(主群)、O群(外周群)和N群(新群或非M非O群)。在M组内，可分为AJ10亚型。在HIV-1和HIV-2之间，核苷酸序列有45%的同源性。而且还有免疫交叉反应。蛋白质印迹可以清楚地区分这两者[6]。2检测HIV感染的方法有100多种[7]，一般可分为抗体检测和病毒检测。病毒检测包括细胞培养(病毒分离)。P24抗原检测和病毒核酸检测。HIV的早期诊断主要是通过血清学检测检测抗HIV抗体，间接诊断HIV感染。近年来，分子生物学方法不断被应用于HIV检测，HIV的实验室诊断方法也取得了很大的进展。核酸检测已经成为HIV实验室诊断的发展方向[8]。抗体通常可以在感染后3-8周检测出来[9]。目前多采用双抗原夹心法，具有较好的敏感性和特异性。抗体检测由初筛和确认试验组成，初筛试验阳性必须进行确认试验。酶联免疫吸附法具有一定的敏感性，操作简单快速。它适用于大量样品的检测。因此，它是目前临床上常用的一种初筛检测方法。国际上有三种确认试验方法[10]，包括蛋白质印迹试验、试纸免疫试验和免疫荧光试验。目前，蛋白质印迹试验是最常用的。在窗口期，检测不到病毒抗体，但可以检测到病毒相关抗原或分离的病毒。在个体感染后血清转化前2-18天可以检测到抗原。因此，在血清转换期检测p24抗原具有很大的优势，可以作为一种早期诊断HIV感染的方法[11]。病毒培养是检测HIV感染最准确的方法。通常，培养外周血单核细胞(PBMC)的方法用于HIV诊断[12]。病毒核酸检测通常通过检测HIVRNA的水平来反映病毒载量，具有较高的灵敏度。利用实时荧光聚合酶链式反应(PCR)技术，可以在艾滋病病毒感染的前两周检测出病毒核酸。病毒核酸的检测方法可用于HIV的早期诊断，如窗口期诊断、病程监测、指导治疗方案和疗效判定、预测疾病进展等。目前，常用的检测方法有逆转录PCR实验(RT \u PCR)和核酸序列扩增实验(NASBA)。分支DNA杂交实验(bDNA)等。利用高灵敏度实时荧光PCR技术，可以在HIV感染的前两周检测到病毒核酸[13，14]。2.1 HIV抗体，抗原检测HIV抗体一般在人感染后几周内逐渐出现，可持续终生[15]。血清学试验分为初筛试验和确认试验。最常用的初级筛选试验和确认试验是酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白质印迹试验(WB)。常规实验方法包括酶联免疫吸附试验、蛋白质印迹试验和间接免疫荧光试验(IFA)。快速检测方法包括明胶颗粒凝集试验、斑点免疫结合试验、p24抗原检测、分子生物学方法和RT \u PCR检测。荧光实时PCR检测技术、支链DNA(bDNA)、连接酶催化的链式反应(LCR)、核酸序列依赖扩增(NASBA)、转录介导扩增(TMA)1.1酶联免疫吸附试验(ELISA)的基本原理是免疫反应物通过化学或免疫学方法形成酶缀合物，酶缀合物能与待测样品中相应的抗原或抗体结合形成免疫复合物。然后加入酶底物，无色底物通过酶的催化或水解产生颜色，用肉眼和分光光度计观察结果。用于初筛的HIVELISA试剂已经发展到第四代检测试剂。第一代试剂主要是用病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板，检测血清中的抗体。因为包被的抗原不是很纯，所以假阳性率高。第二代试剂使用基因工程方法获得的重组抗原和合成肽包被反应板，由于使用了纯化抗原，特异性大大提高。第三代试剂采用双抗原夹心法检测抗体，进一步提高了灵敏度。第四代试剂在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测，同时用HIV抗原和抗P24抗体包被反应板。它可以同时检测血清中的HIV抗体和P24抗原。1.2蛋白质印迹试验蛋白质印迹试验主要用于确认试验。其基本原理是通过SDS \u PAGE电泳分离出完整的HIV抗原，然后将这些分离出来的蛋白质带上电荷，转移到硝酸纤维素膜上。膜被切成条。每个硝酸纤维素膜包含通过电泳分离的HIV病毒抗原。将待测血清样品用稀释剂稀释至1/100，然后直接加到硝酸纤维素膜上，恒温振荡使其充分接触反应。如果血清中含有抗HIV抗体，它会与膜条上的抗原带结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后，有反应的抗原抗体结合带可出现紫棕色。根据显带的结果，据报道，蛋白质印迹试验的特异性不是很好，假阳性率约为2%，但蛋白质印迹试验仍是目前最常用的HIV确认试验。1.3免疫荧光试验(IFA)的基本原理是以H9或HUT￠78培养细胞为载体，用HIV感染细胞，细胞内会含有HIV抗原，HIV感染的淋巴细胞会包被在载玻片上。固定化，制成抗原片，加入待测血清。待测血清中的抗HIV抗体与抗原结合后，与荧光素标记的抗人Ig结合，荧光显微镜下细胞内可见黄绿色荧光。
