磷酸化抗体检测要注意什么

科普大全 2023-08-08 06:00:02

在生活的过程中我们经常会遇到许多的问题，就有朋友问小编有关的问题，那么今天小编就和大家来聊一聊，一起来看看吧。

磷酸化抗体检测要注意什么

磷酸化抗体，其实就是做磷酸化蛋白的检测，但是对于它的一个检测问题，其实很多人都不知道，也不了解。所以下面详细介绍一下磷酸化抗体的一些检测问题。只有对这些常识有了一些科学的认识，生活中遇到这种情况时才不会手足无措。

为了检测磷酸化蛋白，必须向裂解物中加入磷酸酶抑制剂，以防止其使磷酸化蛋白去磷酸化。关于磷酸化蛋白的检测，我想说明几点:

1、组织制备必须在冰上操作，且速度要快。如果不立即制备样品，最好先在液氮中冷冻，即使是两个小时后，也要制备样品，因为磷酸化蛋白容易分解。

2.磷酸酶抑制剂必须加入到组织裂解物中。最好多加蛋白酶抑制剂。防止各种酶水解蛋白质。否则不仅磷酸化检测不出来，总蛋白也检测不出来。

3.对于磷酸化蛋白的测定，加载量可以更大，以便加载相对大量的目标分子。

4.一抗和二抗的孵育时间可以相应延长。我做过一级抗体孵育5小时(室温)，二级抗体孵育2小时的实验，结果很漂亮。

5.推荐你使用发光剂显影法，这样明度更高。

6.压片时间可以相应延长。

以上是磷酸化抗体的介绍。希望通过这些介绍，大家对这个常识有一个科学的认识。事实上，在生活中，我们更多地了解这些常识有助于我们确保自己的健康，避免一些不良影响。这个理解大家要注意。